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EntendiCalcein AM/PI Double Staining Kit
Princípio de detecção:
O kit de dupla coloração Elabscience® Calcein AM/PI pode ser usado para distinguir células mortas e células vivas em mamíferos com atividade esterase. Calceína AM é a adição do grupo acetil metoxi metil éster (AM) à calceína tradicional, que aumenta a hidrofobicidade e pode facilmente penetrar na membrana celular viva e entrar na célula. A própria calceína AM não tem fluorescência. Depois de entrar na célula, é hidrolisado pela esterase endógena na célula para produzir calceína, uma molécula polar com forte carga negativa e não pode ser retida na célula através da membrana celular, enquanto a calceína pode emitir forte fluorescência verde (Ex/Em = 494nm /517 nm). Devido à falta de esterase, as células mortas não podem ou raramente produzem calceína, portanto, apenas as células vivas são coradas com forte fluorescência verde, e as células mortas não podem ser coradas ou coradas muito fracamente. A permeabilidade seletiva da membrana das células mortas é perdida e o iodeto de propídio (PI) pode entrar na célula para se ligar especificamente ao DNA de fita dupla e produzir forte fluorescência vermelha (Ex/Em = 535nm/617nm) para marcar as células mortas. Portanto, a combinação de Calceína AM e PI pode realizar dupla coloração de fluorescência em células vivas e células mortas ao mesmo tempo, o que pode ser utilizado para a detecção de atividade celular e citotoxicidade.
Método de detecção: Fluorimétrico
Tipo de amostra: Células
Tipo de corante: Calceína/PI
Ex/Em (nm): 494/517.535/617
Tempo de ensaio: 30 min
Conjunto de canais: FITC, PE/PerCP/Cy5.5
Conjunto de filtros: FITC, TRITC
Aplicação: Viabilidade/Citotoxicidade
Instrumento de detecção: Citometria de Fluxo, Microscópio de Fluorescência
Outros reagentes necessários: PBS (pH7,2~7,6)(E-IR-R187).
Tamanho: 100, 500 e 2000 testes
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